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标题: 细胞计数方法简介 [打印本页]

作者: guolvfenlitech6 时间: 2021-3-20 13:40
标题: 细胞计数方法简介

2021-03-20 环球过滤分离技术网 guolvfenlitech6

实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。

具体操作：

1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。

2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。

3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：

细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104

说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。

公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：

1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3

（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）

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如上中间有五个浅红色区域的大方格中有400个小格（小格25*中格16=400），对应的体积为0.1mm3，假如上图中五个浅红色区域中有细胞n个，那么，400格就应该有（n/80*400=)5n个细胞，那么，1mm3体积的细胞就应该是5N/0.1，换算成1ml中的细胞个数，就是5N/0.1*1000。如果取样液体是稀释过的，最后要乘以稀释倍数。

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