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本帖最后由 nanotech2 于 2021-4-8 07:22 编辑
3021-04-08 环球过滤分离技术网 nanotech1
移液枪/器的使用
1.装吸头
移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。
错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。
2. 量程设定
操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10-100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35-100%量程范围内操作。
量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。
3. 润洗
用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。
注意:高温或者低温液体请不要润洗!
4. 吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°。
5. 吸头浸入深度
6. 吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
7. 吸液速度
匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。
排液四种方式:
9. 手温
移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
移液枪使用技巧
1. 影响移液枪精度因素
(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差
(2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差
(3)吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头
(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。
2. 使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g。
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
(6)移液器未装吸头时,切莫移液。
(7)在设置量程时,请注意旋转到所需量程,数字清清楚楚在显示窗中,所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
移液器的日常清洁
使用无污染的移液器能确保准确性,因此每次使用前后必须确保移液器清洁。
日常只需清洁移液器的外表面即可,操作如下:
1
拆除移液器中的安全圆锥过滤器
2
使用柔软的无纺布蘸取消毒液或中性清洁剂轻轻擦拭移液器的表面
3
用蘸取纯水(3级)或蒸馏水的湿布彻底清除移液器上的所有清洁剂然后擦干
4
将新的安全圆锥过滤器安装在移液器上
清洁和去污
清洁是指去除移液器上的一切异物,如灰尘、核酸、蛋白质、缓冲液和盐。
去污是指去除或杀死病毒、细菌和真菌等微生物。此外还涉及化学品和放射性物质的去除或中和。
移液器的下半部分要根据使用情况及时清洁和去污,建议每3个月清洁一次, 操作如下:
1
参阅移液器用户手册,查看移液器清洁或去污方案及所选清洁溶剂的化学兼容性
2
戴上手套,拆下移液器下半部分部件
3
使用所选的清洁剂彻底清洁移液器的下半部分部件,并擦拭移液器手柄的外部
4
使用纯水(3 级)或蒸馏水彻底清除移液器上残留的清洁溶剂
5
重新润滑移液器
6
移液器的维护和性能测试可外包给服务供应商
为了彻底清洁和去污,还可对移液器进行高压灭菌,操作如下:
1
取下安全圆锥过滤器
2
确认可高压灭菌的部件
3
将移液器或部件放入灭菌袋,然后置于高压灭菌锅内
4
在121℃和1 bar的高压下灭菌20分钟
5
冷却并晾干相关部件
6
安装新的圆锥过滤器
7
重新组装移液器并进行性能检查
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