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细胞计数方法简介

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发表于 2021-3-20 13:40:55 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式



2021-03-20   环球过滤分离技术网    guolvfenlitech6


     实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。

具体操作:

1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。

2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。

3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算:

细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104

说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。

公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:

1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3

(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液)


      如上中间有五个浅红色区域的大方格中有400个小格(小格25*中格16=400),对应的体积为0.1mm3,假如上图中五个浅红色区域中有细胞n个,那么,400格就应该有(n/80*400=)5n个细胞,那么,1mm3体积的细胞就应该是5N/0.1,换算成1ml中的细胞个数,就是5N/0.1*1000。如果取样液体是稀释过的,最后要乘以稀释倍数。


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