生物大分子常用的浓缩方法简介

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2021-07-15   环球过滤分离技术网  nanopuretech1

生物大分子在制备过程中，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。本文简要介绍了几种常用的浓缩方法；

超滤法浓缩

    超滤法是使用一种特别的薄膜对溶液中各种溶质分子进行选择性过滤的方法，液体在一定压力下（氮气压、真空泵压、离心力等）通过膜时，溶剂和小分子透过，大分子受阻保留。

    应用超滤法关键在于膜的选择，不同类型和规格的膜，水的流速，分子量截止值（即大体上能被膜保留分子最小分子量值）等参数均不同，一般可以使用截留量小于目的蛋白分子量3倍左右的超滤膜来进行。

    特点：特别适用目的蛋白浓度较低时的浓缩；耗时短；

透析袋浓缩

    也称反透析，即将要浓缩的蛋白溶液放进透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），把蔗糖或高分子（6000－12000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等吸水剂配制成一定浓度的溶液撒在透析袋外，将装有蛋白液的透析袋放进即可。吸水剂用过后，可放进温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用

    特点；在目的蛋白浓度较低时，易因透析袋的吸附作用导致蛋白回收率低；耗时长；

冷冻干燥法浓缩

    这是浓缩蛋白质的一种较好的办法，它既使蛋白质不易变性，又保持蛋白质中固有的成分。它是在冰冻状态下直接升华去除水分。

    具体做法是将蛋白液在低温下冰冻，然后移置干燥器内（干燥器内装有干燥剂，如NaOH、CaCl2和硅胶等）。密闭，迅速抽空，并维持在抽空状态。数小时后即可获得含有蛋白的干燥粉末。干燥后的蛋白质保存方便，应用时可配成任意浓度使用。也可采用冻干机进行冷冻干燥

减压蒸发浓缩

    通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。

空气流动蒸发浓缩

    空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液，表面不断通过空气流；

    将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室，用电扇对准吹风，使透过膜外的溶剂不断被蒸发，而达到浓缩目的，此法浓缩速度慢，不适于大量溶液的浓缩。

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