薄膜过滤细菌培养方法介绍

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2020-05-22 环球过滤分离技术网   guolvfenlitech9
透析用水质量直接影响透析患者并发症发生及远期预后，透析用水细菌污染状况的准确评价非常必要。国家最新标准《血液透析及相关治疗用水（YY0572-2015）》已于2017年1月1日起强制执行。在本标准中，推荐使用胰蛋白胨葡萄糖（TGEA）培养基和R2A培养基进行透析用水细菌培养，在17℃-23℃培养168h（7d），并将薄膜过滤法定为透析用水微生物检测的首选方法。在2009年发布的国际标准《血液透析及相关治疗用透析液（ISO11663）》中，透析液细菌培养使用滤膜法时，推荐滤过样本量为10-1000mL。两个标准都对透析室细菌培养工作进行了严格的规范，但是传统微生物培养方法对设备和检测人员都有较高要求，只能通过微生物实验室进行检测。临床上非常需要一种准确，简便的检测方法。

基于上述临床需求，我们介绍一种新型培养皿，其由液体TGEA培养基（预制包装）和一次性无菌培养皿组成。培养皿具有封闭式外壳，配备0.45μm微孔滤膜，采用环氧乙烷灭菌。下面简单介绍该培养皿的使用方法。

    首先，取下滤膜的蓝色盖子，用灭菌注射器向滤膜的流入口注入50-100ml透析液，操作时缓慢注入透析液，并需握紧滤膜防止透析液漏出。透析液全部注入后，用注射器从下侧流出口吸取残留在流入口的透析液，以确保所有透析液都通过滤膜。操作完成后在流入口盖紧蓝色盖子。其次，用套装中的培养基注射器向透析液流出口注入0.4-0.5ml培养基，注入时将针头轻贴滤纸缓慢加入注意不要刺破滤纸。加入培养基过急会导致流出口堵塞，培养基注入困难时，打开流入的蓝色盖子。加入培养基后迅速盖上红色盖子，并将红色盖子朝上放置在恒温器中。17℃-23℃培养168h（7d）后测量菌落个数，并根据注入透析液的量计算1ml透析液中的菌落数量。



本次介绍的培养皿结合了TGEA培养基和薄膜过滤法的特点，大量的滤过样品后，样品中的菌落即留在微孔滤膜上，提高了细菌检测的敏感度。封闭培养皿的设计，降低了对操作人员和操作环境的要求，简化了操作过程，透析室工程师或临床医护人员可自行在日常环境中完成透析用水培养的全部操作。

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